СРЕДА ДЛЯ ЗАМОРАЖИВАНИЯ
И ДЛИТЕЛЬНОГО ХРАНЕНИЯ СПЕРМЫ ЧЕЛОВЕКА
Доктор биологических наук, проф. С.Б. ГРИГОРЯН
Министерство здравоохранения республики Армения, Центр перинатологии, акушерства и гинекологии, государственное дочернее предприятие "Уйс-М". Адрес: Ереван, Ачапняк, Маргаряна, 6, телефон: 56-18-39
Разработана новая синтетическая среда для криоконсервации спермы человека
и внедрена в практику искусственной инсеминации женщин. С этой целью были
выяснены биологические, биофизические и биохимические условия, необходимые
для глубокого замораживания спермы. Чтобы предохранить акросомы сперматозоидов
от набухания,мы использовали сахарозу на том основании, что она широко
применяется в цитологических исследованиях, когда требуется сохранить в
живом состоянии органеллы клеток. Одновременно к изотоническому раствору
сахара мы добавляли около одной пятой по объему раствора кальциево-натриевой
соли ЭДТА. Как известно, кальциевый комплексонат ЭДТА (этилен-диамин-тетрауксусная
кислота) обладает способностью связывать ионы тяжелых металлов - железа,
меди, цинка и других, активирующих окислительные процессы, производимые
водорастворимыми ферментами - оксидазами. Указанное соединение служит также
для защиты сперматозоидов от окисления свободными аминокислотами, приводящего
в конечном итоге к образованию токсичной перекиси водорода. Известно, что наиболее уязвимой структурой мужских половых клеток
является акросомный колпачок на передней части головки сперматозоида. Установлено,
что при подготовке спермы к замораживанию происходит образование токсичных
продуктов окисления липидов, приводящих к структурным изменениям липидного
слоя мембран акросомы и прекращению подвижности сперматозоидов. Учитывая, что акросома представляет собой депо ферментов, воздействующих
на яйцеклетку, и имеет важное значение для оплодотворения, наши поиски
были направлены на химическую защиту сперматозоидов веществами - антиоксидантами.
В частности экспериментально нами была обоснована возможность использования
моноэтаноламина в качестве антиокислителя. Это вещество как антиоксидант
предохраняет мембрану мужских половых клеток от перекисного окисления фосфолипидов
и холодового удара во время криоконсервации и обладает свойством понижения
токсического воздействия криопротектора на клетки. Молекулы этого соединения
включаются в двойной белково-липидный слой мембран и скрепляют фосфолипидные
молекулы, препятствуют их латеральному смещению. Сперма человека, разбавленная новой синтетической средой, предназначенной
для низкотемпературной консервации спермы человека, в состав которой впервые
введены химические защитные вещества (антиоксиданты и комплексонаты - кальций-натрий
ЭДТА), обладает высокой биологической полноценностью и вполне удовлетворительной
оплодотворяющей способностью и успешно внедряется в практику искусственной
инсеминации женщин. Подтверждением этому могут служить следующие параметры.
Если подвижность, резистентность, выживаемость и сохранность акросом спермы
человека в незамороженном состоянии были равны соответственно 80%, 6,5
тыс., 7,0/38oС и 74,0%, то в замороженно-оттаянной сперме эти
же показатели составили 70%, 5 тыс., 5/38 oС и 74% соответственно.
При этом из 1430 женщин, инсеминированных расконсервированной спермой человека,
подготовленной новым криопротектором, 886 или 61,6% забеременели.