СРЕДА ДЛЯ ЗАМОРАЖИВАНИЯ И ДЛИТЕЛЬНОГО ХРАНЕНИЯ СПЕРМЫ ЧЕЛОВЕКА
Доктор биологических наук,
проф. С.Б. ГРИГОРЯН

Министерство здравоохранения республики Армения,
Центр перинатологии, акушерства и гинекологии,
государственное дочернее предприятие "Уйс-М".
Адрес: Ереван, Ачапняк, Маргаряна, 6,
телефон: 56-18-39

Разработана новая синтетическая среда для криоконсервации спермы человека и внедрена в практику искусственной инсеминации женщин. С этой целью были выяснены биологические, биофизические и биохимические условия, необходимые для глубокого замораживания спермы. Чтобы предохранить акросомы сперматозоидов от набухания,мы использовали сахарозу на том основании, что она широко применяется в цитологических исследованиях, когда требуется сохранить в живом состоянии органеллы клеток. Одновременно к изотоническому раствору сахара мы добавляли около одной пятой по объему раствора кальциево-натриевой соли ЭДТА. Как известно, кальциевый комплексонат ЭДТА (этилен-диамин-тетрауксусная кислота) обладает способностью связывать ионы тяжелых металлов - железа, меди, цинка и других, активирующих окислительные процессы, производимые водорастворимыми ферментами - оксидазами. Указанное соединение служит также для защиты сперматозоидов от окисления свободными аминокислотами, приводящего в конечном итоге к образованию токсичной перекиси водорода.
Известно, что наиболее уязвимой структурой мужских половых клеток является акросомный колпачок на передней части головки сперматозоида. Установлено, что при подготовке спермы к замораживанию происходит образование токсичных продуктов окисления липидов, приводящих к структурным изменениям липидного слоя мембран акросомы и прекращению подвижности сперматозоидов.
Учитывая, что акросома представляет собой депо ферментов, воздействующих на яйцеклетку, и имеет важное значение для оплодотворения, наши поиски были направлены на химическую защиту сперматозоидов веществами - антиоксидантами. В частности экспериментально нами была обоснована возможность использования моноэтаноламина в качестве антиокислителя. Это вещество как антиоксидант предохраняет мембрану мужских половых клеток от перекисного окисления фосфолипидов и холодового удара во время криоконсервации и обладает свойством понижения токсического воздействия криопротектора на клетки. Молекулы этого соединения включаются в двойной белково-липидный слой мембран и скрепляют фосфолипидные молекулы, препятствуют их латеральному смещению.
Сперма человека, разбавленная новой синтетической средой, предназначенной для низкотемпературной консервации спермы человека, в состав которой впервые введены химические защитные вещества (антиоксиданты и комплексонаты - кальций-натрий ЭДТА), обладает высокой биологической полноценностью и вполне удовлетворительной оплодотворяющей способностью и успешно внедряется в практику искусственной инсеминации женщин. Подтверждением этому могут служить следующие параметры. Если подвижность, резистентность, выживаемость и сохранность акросом спермы человека в незамороженном состоянии были равны соответственно 80%, 6,5 тыс., 7,0/38oС и 74,0%, то в замороженно-оттаянной сперме эти же показатели составили 70%, 5 тыс., 5/38 oС и 74% соответственно. При этом из 1430 женщин, инсеминированных расконсервированной спермой человека, подготовленной новым криопротектором, 886 или 61,6% забеременели.